
单细胞测序是指在单个细胞水平上对基因组/转录组进行扩增与测序的一项新技术。该技术的建立需要两个必备条件:1.高质量的全基因组/转录组扩增技术2.高通量低成本的测序技术(NextGenerationSequencing,NGS)。晶能生物推出单细胞全基因组/转录组扩增测序技术服务,解决了基因组/转录组扩增对初始模板过大的偏倚,使基因组测序的模板需求量从μg级降至单细胞水平。 1、单细胞全基因组测序服务 全基因组扩增技术(WholeGenomeAmplification,WGA)是一种对全部基因组序列进行非选择性、均匀扩增的技术,其目的是在没有序列偏向性的前提下大幅增加DNA的总量。试剂盒:REPLI-gSingleCellKit(Qiagen) 产品特点: 所需样品起始量为一个细胞或10pgDNA采用多重置换扩增技术(MDA)对基因组位点进行无偏差的扩增专利的phi29聚合酶保证扩增的无偏差性产量稳定,可达40μg(产物平均长度大于>10kb)可用于癌症、干细胞或宏观基因组学研究 2、单细胞全转录组测序服务试剂盒:SMARTerUltraLowRNAKit(Clontech) 产品特点: 低起始量只需10pgRNA获得完整转录组信息,无5’或3’偏向性保持原有相对丰度的基础上扩增mRNA 1、单细胞全基因组测序服务原理流程图: 产品质量评价: 高分子量的DNA片段 能够覆盖基因组所有位点 单细胞、1000个细胞中获得DNA经Repli-G扩增后与大量细胞(>107)中提取的DNA平行进行二代测序,结果一致性很好 2、单细胞转录组测序服务原理流程图: 产品质量评价: RNA上样量从1ng-0.01ng(10pg),均匀覆盖整个基因区域,无5'或3'偏向性 表达转录组的定量、全长覆盖度
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